利用表皮细胞生长因子基因，用于人表皮细胞复合皮的构建与移植，这种技术怎么样？？

王雪 2021-07-30 03:46

表皮细胞作为基因治疗的靶细胞,可通过局部合成和持续释放外源性细胞因子,促进局部创面的修复。有研究应用病毒媒介基因转移法,把编码血小板源性生长因子-A的基因转入培养的表皮细胞,回植体内后可合成和分泌高水平的PDGF-A,加速血管形成、纤维结缔组织沉积,促进Ⅰ型和Ⅳ型胶原合成、分泌,抑制创面收缩。有研究探讨了含转染EGF基因的表皮细胞复合皮的体外构建与移植的效果,以观察转基因细胞对创面修复及细胞增殖的影响。实验中考虑到如果单纯开发者_开发技巧将EGF基因转染的自体表皮细胞移植封闭创面,一方面细胞培养、基因转染过程复杂,耗时长。另一方面转入基因可长期存在,可能导致外源基因的整合、插入,引起不良后果。而如果单纯移植转EGF基因的异体表皮细胞复合皮,尽管可预先培养、转染细胞,减少前期准备工作,但最终因排斥反应,导致创面裸露。因此设想将自体表皮细胞与转染EGF基因的非自体表皮细胞混合,构建复合皮后移植,一方面可节省自体皮源,缩短自体表皮细胞的体外培养扩增时间,另一方面转基因的非自体细胞逐渐被排斥,可避免外源基因插入可能导致的潜在危害。有研究表明,自体表皮细胞与转EGF基因的非自体表皮细胞按1：1、1：3、1：5比例混合,均可修复创面,未见明显创面裸露,与文献报道一致。不同比例混合培养复合皮移植后1、2周内,均可见EGF表达。1：5混合培养复合皮移植后1周,新生表皮基底层中PCNA阳性细胞数较单纯自体(小鼠)表皮细胞移植多。PCNA是一种与细胞周期相关的核蛋白,直接参与DNA的合成,在静止细胞内含量很低,其表达在一定程度上可反应细胞的增殖状态。结果表明,转EGF基因的人表皮细胞在移植后早期分泌EGF,并可促进表皮细胞的增殖,但表皮厚度及移植存活率差异均无显著性。表明EGF的作用尚有限,可能是由于转基因表皮细胞EGF表达量低。将自体表皮细胞与转染EGF基因的非自体表皮细胞混合构建复合皮,不但可节省自体皮源,而且基因修饰的表皮细胞移植后能分泌相应的生长因子,一定程度上可提高表皮细胞的增殖活性。如何使EGF基因在体内得到稳定而较高的表达尚需进一步探讨。

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