PCR引物纯化的方法有哪些呢？？

xiaobai87724 2021-08-09 02:49

采用OPC纯化，制品纯度大于9开发者_运维知识库0%。此级别制品可用作PCR引物，DNA测序引物、各种探针等。该级别只提供长度在35mer以下的合成DNA制品。序列更长时，制品的纯度得不到保证。

采用PAGE纯化，制品纯度大于95%。如订购的DNA欲用作RT-PCR引物、各种探针，或用于PCR克隆测序、定点突变等，请选用PAGE纯化制品。当合成的DNA的序列较长（≥40mer）时，PAGE是最好的纯化方法。

采用HPLC纯化，制品纯度大于99%。由于制品纯度非常高，使用本法纯化的DNA制品可适用于各种基因工程实验。特别是：PCR克隆、定点突变、人工合成基因等。不过，本法只对纯化较短序列（＜40mer）特别有效，合成更长序列（≥40mer）时，请选择PAGE纯化制品。

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夏简西西 2021-08-09 03:04

有以下几种方法：
1.C18柱脱盐：它对DNA有特异性的吸附，可以被有机溶解洗脱，但不会被水洗脱，这种方法一般不会对普通PCR反应产生影响。对于需要用于测序、克隆的引物不能使用这个级别。

2.OPC纯化： OPC法纯化的DNA纯度大于95%。适用于40mer以下引物的纯化。
3.PAGE纯：PAGE纯化法是使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，对DNA片段进行分离，然后从凝胶中回收目的DNA的方法。PAGE纯化法也是一种非常有效的DN开发者_StackOverflow中文版A纯化方法，纯化后的DNA纯度大于95%，对长链Oligo DNA (大于50mer)的纯化特别有效。
4.HPLC纯化：HPLC纯化是使用高效液相色谱的原理，对DNA片段进行纯化。纯度可以大于99%。主要用于短链和修饰引物的纯化。该法的弱点是成本较高，批量生产效率不高。

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