克隆基因定位法是怎样一种技术？？

jy开发者_如何学Gob197412 2021-08-12 15:32

习惯上，人们用克隆表示由同一物种具有相同基因型的两个或多个个体组成的群体。基因定位克隆或图位克隆（map-based cloning）是用于分离其编码产物尚不知道的目的基因的一种有效的方法。
具体的步骤是先将目的基因，亦即目的基因的突变定位到染色体上，并在目的基因的两侧确定一对紧密连锁的RFLP或RAPD分子标记；
接着利用最紧密连锁的一对两侧分子标记作探针，通过染色体步移技术将位于这两个分子标记之间的含目的基因的特定的片段克隆并分离出来；
最后是根据其同突变体发生遗传互补的能力从此克隆中鉴定出目的基因。
成功地应用基因定位技术分离目的基因的一个必要条件是，以酵母人工染色体YAC（yeast artificial chromosome）为载体构建含有大片段DNA的YAC库。另一个必要的条件是要有可用的同目的的基因紧密连锁的DNA探针。

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魅力佳人 开发者_运维问答 2021-08-12 15:42

克隆基因定位法是用已克隆基因的cDNA探针与保留在杂种细胞内的人染色体DNA顺序进行分子杂交，来确定克隆基因所在的染色体位置的方法。如要定位人体白蛋白基因，首先以人体白蛋白基因cDNA为探针，分别与经过Hind III酶切后的人体细胞和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)DNA杂交，杂交后的人体细胞DNA显示6.8 kb带型，CHO细胞的DNA显示3.5 kb带型。

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