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2021-09-13 17:21
第三代慢病毒载体进一步做了些安全方面的改进,如删除了U3区的3′LTR和tat基因。在载体质粒上插入了cPPT(增加基因表达水平)及WPRE(增加感染滴度),在一个包装载体中插入腺病毒VA基因以增加感染滴度;同时在整个系统载体的多个部分做了一些基因的优化或删减和插入以增加病毒的安全性。经过这样的优化,最新一代慢病毒表达系统的包装容量增大到10kb,在应用上更广泛;其感染细胞的滴度及外开发者_如何学编程源基因的表达水平均提高,这也在一定程度上弥补了慢病毒在基因治疗领域内的不足;由于对整个慢病毒系统的多层面改造,降低了载体间的同源率和重组机率,更安全。
qiukangyiang021 2021-09-13 17:25
与“简单型”逆转录病毒不同的是,慢病毒由于存在辅助蛋白和调控蛋白,其载体改造涉及更多的对这些反式作用因子的去除以及相应的顺式作用元件的改造。
第三代慢病毒载体去除了对Tat和Rev蛋白因子的依赖作用。通过将5’LTR中的开发者_运维技巧U3区替换成CMV,可以消除对Tat的依赖;通过对gag-pol编码基因的密码子进行优化,可以解除对Rev的依赖。
第三代慢病毒载体进一步做了些安全方面的改进,如删除了U3区的3′LTR和tat基因。在载体质粒上插入了cPPT(增加基因表达水平)及WPRE(增加感染滴度),在一个包装载体中插入腺病毒VA基因以增加感染滴度;同时在整个系统载体的多个部分做了一些基因的优化或删减和插入以增加病毒的安全性。经过这样的优化,最新一代慢病毒表达系统的包装容量增大到10kb,在应用上更广泛;其感染细胞的滴度及外开发者_如何学编程源基因的表达水平均提高,这也在一定程度上弥补了慢病毒在基因治疗领域内的不足;由于对整个慢病毒系统的多层面改造,降低了载体间的同源率和重组机率,更安全。
qiukangyiang021 2021-09-13 17:25
与“简单型”逆转录病毒不同的是,慢病毒由于存在辅助蛋白和调控蛋白,其载体改造涉及更多的对这些反式作用因子的去除以及相应的顺式作用元件的改造。
第三代慢病毒载体去除了对Tat和Rev蛋白因子的依赖作用。通过将5’LTR中的开发者_运维技巧U3区替换成CMV,可以消除对Tat的依赖;通过对gag-pol编码基因的密码子进行优化,可以解除对Rev的依赖。
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