柳栋
2021-06-07 11:06
开发者_运维知识库
实时定量RT-PCR是在普通PCR反应中加入能与PCR产物结合的荧光探针或荧光染料,使之荧光信号随着扩增产物的增加而成比例增长,仪器实时检测每一个循环结束后的荧光强度,通过与标准曲线对比得出定量结果。可以直接检测目的基因的起始数量,从而动态监测融合基因水平。从扩增到产物分析都是闭管操作,最大限度避免了污染,无PCR后处理。SYB RgreenⅠ是一种能与双链DNA结合的荧光染料,游离时几乎没有荧光信号,本底很低。PCR进行过程中,它能结合到扩增产物双链DNA的小沟中,荧光强度大大增强。
实时定量RT-PCR是在普通PCR反应中加入能与PCR产物结合的荧光探针或荧光染料,使之荧光信号随着扩增产物的增加而成比例增长,仪器实时检测每一个循环结束后的荧光强度,通过与标准曲线对比得出定量结果。可以直接检测目的基因的起始数量,从而动态监测融合基因水平。从扩增到产物分析都是闭管操作,最大限度避免了污染,无PCR后处理。SYB RgreenⅠ是一种能与双链DNA结合的荧光染料,游离时几乎没有荧光信号,本底很低。PCR进行过程中,它能结合到扩增产物双链DNA的小沟中,荧光强度大大增强。
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