封剑波
2021-06-13 09:48开发者_StackOverflow中文版
这个目前主要有三种，第一种称为体内法或直接法,就是直接向体内组织或器官转基因，使其表达后在全身发挥作用，现已在腹腔、静脉、动脉、肝及肌肉等多种组织器官获得成功，但目前存在基因转移和表达效率低等困难。第二种称为间接法或回输法，或称为离体法，即选择适当的靶细胞，一般取自患者，在体外进行基因转移，筛选出表达外源基因的细胞，再将这些转基因细胞放回到患者体内。这是目前应用较多的方式，但其操作比直接法繁琐。第三种称为原位法,指把基因直接导入患者的疾病部位(如肿瘤、肺)的组织，使其表达后在病变局部发挥作用。
楚玲珑k 2021-06-13 09:49
基因转移是将外源基因导入细胞内。常用的基因转移方法有：化学法、物理法、同源重组法和载体法。
1 化学法。
将正常基因DNA（及其拷贝）与带电荷物质和磷酸钙、DEAE–葡萄糖或与若干脂类混合，形成沉淀的DNA微细颗粒，通过注射进入体内，由于钙离子有促进DNA透过细胞的作用，某些化合物可扰乱细胞膜，故可将DNA输入细胞内，并整合于受体细胞的基因组中，在适当的条件下，整合基因得以表达，细胞亦可传代。这种方法虽简单，但效率极低，一般1000–100000个细胞中只有一个细胞可结合导入的外源基因。要达到治疗目的，就需要从病人获得大量的受体细胞。当然，可以通过选择培养的方法来提高转化率。
2 物理法。
运用物理和机械的方法，例如亲水的递送（HD）方法，在小鼠的尾血管快速注入大量的核酸溶液，可以短暂地破坏血管和组织的完整性，达到递送的目的；除此之外，还有电导、超声、粒子为基础的“基因枪”等方法。物理和机械递送方法，如基因枪法、电穿孔法、声穿孔法、激光照射开发者_JAVA百科法、磁转换法等，虽然有各具优点并达到一定效果，但也存在如组织穿透力差、毒性及侵蚀性、潜在副作用、效率低等缺陷。
3 同源重组法（Homologous recombination）
将外源基因定位导入受体细胞的染色体上，在该座位因有同源序列，通过单一或双交换，新基因片段替换有缺陷的片段，达到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁组装一Neo基因，则在同源重组后，因有Neo基因，可在含有新霉素（Neomycin）的培养基中生长，从而使未插入新基因片段的细胞死亡。对于体细胞基因治疗，体外培养细胞的时间过长，筛选量大，故在临床上应用也受限制。今后如能改进技术，提高重组率，这种定点修正基因的方法仍具有前景。
4 载体法（Vector）
将基因与载体材料符合形成纳米粒，注射入体内。不同的传递路线将影响整体需要的剂量、有效的组织分布、潜在的副作用、所需要的化学修饰以及递送试剂等方面：静脉注射；直接注射，如注射到肿瘤、连接、眼内；局部作用到表面，如穿过口、直肠、阴道粘膜的上皮而吸收；直接作用于中枢神经系统（CNS），如膜内或心室内注射，还可绕过血管屏障渗透的问题；肺部递送，如吸入、鼻内和气管内作用。
wang****uan55 2021-06-13 09:53
不知题主问的是什么细胞，如果是微生物的话，常用的有转化、接合、转导。对于其他细胞，原理应该都是通用的。
转化（英语：transformation，又译转型）即细胞通过摄取外源遗传物质(DNA或RNA)而发生遗传学改变的过程。在转化过程中，转化的DNA片段称为转化因子。受体菌只有处在感受态时才能够摄取转化因子。转化因子通常是质粒DNA。而质粒融合或病毒感染是开发者_运维技巧导致引入外源DNA的原因。动物细胞的转化又被称为转染(transfection)。
在分子生物学实验中，细胞通过特殊处理后可变成感受态细胞(competent cells)，即可以接受外源DNA。有两种常用方法：
电穿孔法：细胞与DNA混合；高电压脉冲；随后在富营养培养基内复苏。多用于对酵母细胞的转化。
化学方法：将细胞悬浮于0℃的氯化钙溶液中，并加入外源DNA（一般为质粒），混合后放置约半小时；短暂（一般为75－90秒）升温至42℃（即热休克）；加入富营养培养基以进行复苏。该方法一般用于对原核细胞，特别是大肠杆菌的转化。
接合（英文：Conjugation，又译结合），又称为接合作用、细菌接合，是发生于原生动物间的现象，指的是两个细菌之间发生的一种遗传物质交换现象，属于细菌有性生殖的一个重要阶段。在接合现象发生时，两个细胞直接接合或者通过类似于桥一样的通道接合，并且发生基因的转移。这种现象是在1946年被Joshua Lederberg和Edward Tatum所发现，接合与转化和转导都被称作基因水平转移机制，注意的是这种机制并不一定需要两个细胞-细胞间的直接接触。
遗传信息的转移通常对受体是有益的。好处包括获得抗生素耐药性，或者获得其他的特异性以应对环境的变化。这种对受体有益的质粒可以被视作内共生生物。然而从别的方面来看，细菌的寄生和接合可以作为细菌的一种进化方式使它们得到个体的繁衍与基因的扩散。
转导（英语：Transduction）是指因病毒（即噬菌体）入侵而将一个细菌的DNA片断转置到另一细菌中的过程，亦可指透过病毒载体把外来DNA带入到细菌中的过程。“转导作用”与摄取外源遗传物质改变染色体的“转化作用”、以及两个细菌碰触后交换遗传物质的“接合作用”，是目前已知 3 种细菌交换基因的方式。
这个目前主要有三种，第一种称为体内法或直接法,就是直接向体内组织或器官转基因，使其表达后在全身发挥作用，现已在腹腔、静脉、动脉、肝及肌肉等多种组织器官获得成功，但目前存在基因转移和表达效率低等困难。第二种称为间接法或回输法，或称为离体法，即选择适当的靶细胞，一般取自患者，在体外进行基因转移，筛选出表达外源基因的细胞，再将这些转基因细胞放回到患者体内。这是目前应用较多的方式，但其操作比直接法繁琐。第三种称为原位法,指把基因直接导入患者的疾病部位(如肿瘤、肺)的组织，使其表达后在病变局部发挥作用。
楚玲珑k 2021-06-13 09:49
基因转移是将外源基因导入细胞内。常用的基因转移方法有：化学法、物理法、同源重组法和载体法。
1 化学法。
将正常基因DNA（及其拷贝）与带电荷物质和磷酸钙、DEAE–葡萄糖或与若干脂类混合，形成沉淀的DNA微细颗粒，通过注射进入体内，由于钙离子有促进DNA透过细胞的作用，某些化合物可扰乱细胞膜，故可将DNA输入细胞内，并整合于受体细胞的基因组中，在适当的条件下，整合基因得以表达，细胞亦可传代。这种方法虽简单，但效率极低，一般1000–100000个细胞中只有一个细胞可结合导入的外源基因。要达到治疗目的，就需要从病人获得大量的受体细胞。当然，可以通过选择培养的方法来提高转化率。
2 物理法。
运用物理和机械的方法，例如亲水的递送（HD）方法，在小鼠的尾血管快速注入大量的核酸溶液，可以短暂地破坏血管和组织的完整性，达到递送的目的；除此之外，还有电导、超声、粒子为基础的“基因枪”等方法。物理和机械递送方法，如基因枪法、电穿孔法、声穿孔法、激光照射开发者_JAVA百科法、磁转换法等，虽然有各具优点并达到一定效果，但也存在如组织穿透力差、毒性及侵蚀性、潜在副作用、效率低等缺陷。
3 同源重组法（Homologous recombination）
将外源基因定位导入受体细胞的染色体上，在该座位因有同源序列，通过单一或双交换，新基因片段替换有缺陷的片段，达到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁组装一Neo基因，则在同源重组后，因有Neo基因，可在含有新霉素（Neomycin）的培养基中生长，从而使未插入新基因片段的细胞死亡。对于体细胞基因治疗，体外培养细胞的时间过长，筛选量大，故在临床上应用也受限制。今后如能改进技术，提高重组率，这种定点修正基因的方法仍具有前景。
4 载体法（Vector）
将基因与载体材料符合形成纳米粒，注射入体内。不同的传递路线将影响整体需要的剂量、有效的组织分布、潜在的副作用、所需要的化学修饰以及递送试剂等方面：静脉注射；直接注射，如注射到肿瘤、连接、眼内；局部作用到表面，如穿过口、直肠、阴道粘膜的上皮而吸收；直接作用于中枢神经系统（CNS），如膜内或心室内注射，还可绕过血管屏障渗透的问题；肺部递送，如吸入、鼻内和气管内作用。
wang****uan55 2021-06-13 09:53
不知题主问的是什么细胞，如果是微生物的话，常用的有转化、接合、转导。对于其他细胞，原理应该都是通用的。
转化（英语：transformation，又译转型）即细胞通过摄取外源遗传物质(DNA或RNA)而发生遗传学改变的过程。在转化过程中，转化的DNA片段称为转化因子。受体菌只有处在感受态时才能够摄取转化因子。转化因子通常是质粒DNA。而质粒融合或病毒感染是开发者_运维技巧导致引入外源DNA的原因。动物细胞的转化又被称为转染(transfection)。
在分子生物学实验中，细胞通过特殊处理后可变成感受态细胞(competent cells)，即可以接受外源DNA。有两种常用方法：
电穿孔法：细胞与DNA混合；高电压脉冲；随后在富营养培养基内复苏。多用于对酵母细胞的转化。
化学方法：将细胞悬浮于0℃的氯化钙溶液中，并加入外源DNA（一般为质粒），混合后放置约半小时；短暂（一般为75－90秒）升温至42℃（即热休克）；加入富营养培养基以进行复苏。该方法一般用于对原核细胞，特别是大肠杆菌的转化。
接合（英文：Conjugation，又译结合），又称为接合作用、细菌接合，是发生于原生动物间的现象，指的是两个细菌之间发生的一种遗传物质交换现象，属于细菌有性生殖的一个重要阶段。在接合现象发生时，两个细胞直接接合或者通过类似于桥一样的通道接合，并且发生基因的转移。这种现象是在1946年被Joshua Lederberg和Edward Tatum所发现，接合与转化和转导都被称作基因水平转移机制，注意的是这种机制并不一定需要两个细胞-细胞间的直接接触。
遗传信息的转移通常对受体是有益的。好处包括获得抗生素耐药性，或者获得其他的特异性以应对环境的变化。这种对受体有益的质粒可以被视作内共生生物。然而从别的方面来看，细菌的寄生和接合可以作为细菌的一种进化方式使它们得到个体的繁衍与基因的扩散。
转导（英语：Transduction）是指因病毒（即噬菌体）入侵而将一个细菌的DNA片断转置到另一细菌中的过程，亦可指透过病毒载体把外来DNA带入到细菌中的过程。“转导作用”与摄取外源遗传物质改变染色体的“转化作用”、以及两个细菌碰触后交换遗传物质的“接合作用”，是目前已知 3 种细菌交换基因的方式。
![Interactive visualization of a graph in python [closed]](https://www.devze.com/res/2023/04-10/09/92d32fe8c0d22fb96bd6f6e8b7d1f457.gif)
加载中,请稍侯......
精彩评论